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尋找藍海—腦脊液特異性抗體檢測
神經系統感染性疾病十分常見，是一組由細菌、真菌、病毒和螺旋體等多種病原體侵犯腦實質和血管等引起的急、慢性炎癥性或非炎癥性疾病，根據感染的部位不同可分單個部位感染和多部位感染（見圖1）。神經系統急性感染是臨床醫療中最重視的問題之一，尤其是各類腦膜炎如化膿性腦膜炎（化腦）、病毒性腦膜炎（病腦）、結核性腦膜炎（結腦），具有發病急、進展快、病死率和致殘率高等特點，對這類疾病進行早期診斷、實施快速而有效的治療有重要意義。
圖1：神經系統感染性疾病感染的解剖圖
對于中樞神經系統感染性疾病的診斷仍需依賴腦脊液檢查結果，尤其是病原微生物的檢查結果。不同炎癥反應（包括細菌性、病毒性、肉芽腫性）腦脊液成分特點不同，通常以腦脊液常規實驗室檢測進行鑒別診斷，然而因經驗性抗生素的應用，各類腦膜炎患者的臨床癥狀、體征及腦脊液改變越來越不典型，且炎癥指標易受到外界因素影響，對鑒別病毒性、化膿性腦膜炎局限性較大，無法判斷感染程度。
血清病原體抗體陽性僅能證明體內存在病原微生物感染，唯有腦脊液檢出病原體抗體才表明存在中樞神經系統感染性免疫反應。根據中樞神經系統感染性疾病的病原體類型分為細菌性感染、病毒性感染、真菌性感染、寄生性感染等；從目前的調研來看，用于腦脊液抗體檢測的試劑在NMPA中暫無注冊產品（見表1），也就是說目前關于腦脊液抗體檢測試劑在國內市場的臨床注冊產品仍處于空白。
雖然國內用于腦脊液抗體檢測的試劑仍處于空白，但檢測腦脊液特異性抗體對臨床診斷具有重要意義；目前國內各大研究機構、臨床科室及臨床檢驗中心已針對中樞神經系統感染性疾病的腦脊液特異性抗體檢測開展了大量的前瞻性研究（見表２）。
根據《Global, regional, and national burden ofmeningitis, 1990–2016: a systematic analysis for the Global Burden of DiseaseStudy 2016》的研究，中國的病毒性腦膜炎死亡人數是全球最高的前十個國家之一，發病率為4-5/10萬，與艾滋病的發病率相仿（艾滋病：4/10萬），而病毒性腦膜炎只是中樞神經系統感染性疾病的冰山一角；可見中樞神經系統感染性疾病的腦脊液特異性抗體檢測在中國乃至海外市場仍處于藍海領域。
小結：
1、腦脊液抗體檢測在國內市場處于空白領域；
2、針對中樞神經系統感染性疾病的市場臨床需求量大。
腦脊液特異性抗體檢測的臨床意義
腦脊液具有可以調節顱內壓，參與腦組織物質代謝，保護腦組織等作用，是一種極其重要的動態代謝活性物質。中樞神經系統是一個獨立完整的免疫系統，腦脊液為中樞神經系統提供了一個穩定的內環境，血腦屏障（BBB，Blood Brain Barrier）是中樞神經組織重要的保護層，維持腦內環境穩定發揮著重要作用；當細菌、真菌、病毒和螺旋體等多種病原體引起相應的中樞神經系統感染性疾病時，血腦屏障的結構和功能發生改變，引起血腦屏障的通透性增加，使大量蛋白質成分入腦；而在中樞神經系統疾病中，不論血腦屏障是正常的還是受損的，均發現有免疫球蛋白，無法判斷腦脊液中免疫球蛋白的來源。近年來研究證實一些B淋巴細胞、T淋巴細胞可以穿越血腦屏障，成了腦脊液中免疫系統的一員；當腦脊液受到病原體的感染時，中樞神經系統也將啟動體液免疫應答產生鞘內保護性抗體；因此，腦脊液中的抗體來源有兩部分：
1)????B細胞產生的（腦源性蛋白）；
2)????血液跨過血腦屏障被動擴散產生的（血源性蛋白）；
????要區分該兩種蛋白成分，就必須考慮血腦屏障功能和糾正腦脊液中產生的特異性抗體，從而大大提高診斷中樞神經系統感染性疾病的準確性和臨床實用性；當前認為抗體指數（AI，Antibody Index）是反映鞘內異常體液免疫反應的重要指標，鞘內免疫合成的定量抗體檢測對于診斷、治療中樞神經系統感染性疾病有著重要意義。
AI=Qspec/QlgG
（AI：Antibody Index; Qspec：the cerebrospinal fluid (CSF)/serum quotients for specificantibodies；QlgG：total IgG）
AI正常參考范圍：0.7-1.3；
AI≥1.5表示中樞神經系統中有局部特異性抗體合成。
AI是定量評價鞘內IgG合成的一種常用方法，且包含反映血腦屏障功能狀態的最好指標。
在Hansotto Reiber的研究中，除了可以定量評價鞘內IgG，還可用于分析鞘內IgA和IgM的生成情況（見圖2）。
圖2：AI在腦脊液特異性抗體IgA、IgG、IgM的應用
AI已在多發性硬化癥、單純皰疹、水痘-帶狀皰疹、HIV和萊姆病等多種中樞神經系統感染性疾病中得到應用，且診斷的敏感性和特異性均高于特異性抗體Western Blot、寡克隆區帶、IEF（等電聚焦電泳法）（見圖3）。
圖3：抗體指數在中樞神經系統感染性疾病感染的評估
需要腦脊液特異性抗體檢測的病原體有哪些？
Roberta L. DeBiasi的研究認為在中樞神經系統疾病的診斷中腦脊液檢測是極為有效的；根據國內外文獻研究，可引起中樞神經系統感染疾病的病原體如下表（見表３）。
腦脊液特異性抗體檢測試劑的關鍵原料——抗原在哪里？
”好試劑的基礎是好原料“，生產企業一定要認真篩選符合企業發展戰略、產品結構、產品質量要求的優質上游原材料。?只有這樣，才能生產出好的產品，確保產品的質量。歐美國家大量關于腦脊液抗體檢測的臨床醫療器械創新網表明，德國維潤賽潤的相關抗原用于生產腦脊液特異性抗體檢測試劑已獲歐美市場普遍認可，符合CE認證標準。以下是部分醫療器械創新網：
案例1：
荷蘭鹿特丹伊拉斯姆斯醫學中心持續研究了2009-2019年間的HSV（單純皰疹病毒）、VZV（水痘-帶狀皰疹病毒）、風疹、麻疹、腸道病毒、A型流感、B型流感、CMV（巨細胞病毒）、TBEV（蜱傳腦炎病毒）、WNV（西尼羅河病毒）等病毒感染的抗體指數分布，建立抗體指數的有效值，為鞘內特異性抗體合成提供有力證據的同時也將發揮國家及國際參考的作用。
圖4：2009-2019年測定多種特異性鞘內抗體指數
案例2：德國弗萊堡醫學中心一項關于鞘內特異性抗體指數AI區分中樞神經受累的風濕病與多發性硬化癥的研究表明，腦脊液抗體指數是確診多發性硬化癥的檢測方法，也是快速診斷及鑒別診斷的必要方法。
圖５：針對麻疹、風疹、水痘-帶狀皰疹病毒的多種鞘內特異性抗體指數的評估
圖6：評估麻疹、風疹、水痘-帶狀皰疹病毒的鞘內特異性抗體指數
總結：
超越模仿，IVD行業將會迎接更美好的未來；創新跨越，基礎和保障的關鍵是核心原材料。Virion\Serion GmbH(德國維潤賽潤)擁有BSL-3三級生物安全實驗室（P3實驗室），在病原體診斷領域的經驗和技術積累超過四十年，相關抗原用于生產腦脊液特異性抗體檢測試劑符合CE認證標準，在國外已廣泛應用于開發商品化試劑，是我國IVD生產廠家研發和生產腦脊液抗體檢測試劑的可靠保障！
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